cosmobiousa GFK-PF201-0.25-EX說明書

PUREfrex 2.0

貨號：

GFK-PF201-0.25-EX

$ 166.00

PUREfrex®  （由Gene Frontier Corporation制造）是一種大腸桿菌 重構的偶聯轉錄/翻譯系統，基于初由Ueda小組開發的PURE系統（Shimizu等，2001），后來商業化為PURESYSTEM®（Shimizu和Ueda， 2010年），由BioComber（日本東京）提供。PUREfrex®包含高度純化的 大腸桿菌蛋白質，包括用于氨酰化，能量再生，轉錄和翻譯的模塊。與競爭的耦合轉錄/翻譯系統相比，PUREfrex®的許多優點中包括降低的污染性蛋白酶，核酸酶和磷酸酶，β-半乳糖苷酶和LPS的水平。與基于細胞裂解物的系統相比，PUREfrex®的化學定義更加明確和模塊化，可帶來更高的產量，可重復性和靈活性。在未標記 PUREfrex®的蛋白質成分（與BioComber的PURESYSTEM®和New England Biolab的PURExpress®系統的六組氨酸標記成分相反）允許在目標蛋白質中添加任何所需的標簽（包括His-tags），并隨后通過快速簡單地純化一個固定的金屬親和色譜步驟。蛋白質產量可以達到600ng / ul。

PUREfrex®有兩種形式：PUREfrex®2.0和PUREfrex®2.1。PUREfrex®2.1與PUREfrex®2.0相同，其附加功能使用戶可以控制氧化還原條件。這對于需要特殊氧化還原條件以實現適當折疊，活性和溶解度的蛋白質很有用。此外，還提供補充產品來進一步增強適當的蛋白質折疊和二硫鍵形成（GroE Mix，DnaK Mix和DS Supplement  （將逐步淘汰并由Dsbc Set代替））。

通過利用Protein Express的 tRNA試劑的CloverDirect™系列進行定點蛋白質功能化，可以將PUREfrex®用于表達包含非天然氨基酸的  蛋白質。可用CloverDirect™UAG或CGGG氨酰基tRNA填充不同的非天然氨基酸，這些氨基酸賦予一系列功能，包括熒光標記，生物素標記，聚乙二醇化，化學交聯和光調節。通過設計在用戶定義位置具有UAG和/或CGGG密碼子的蛋白質表達模板，可以實現特定非天然氨基酸的靶向摻入。

對于模板構建，我們建議使用Protein Express線性模板PCR試劑盒（有兩種形式：僅His-tag或ProX-tag + His-tag）或Protein Express的表達質粒（pROX-FL92.1：ProX-tag + His-標簽）或BioComber（pURE1-4：無標簽）。ProX標簽是特殊的N末端肽，設計用于摻入某些需要N末端定位（密碼子9）和特定密碼子背景（由AAC和TCT修飾）的大型非天然氨基酸。ProX標簽的密碼子9可以在UAG，CGGG或TTT（作為對照）之間變化。