上海起發(fā)haemtech HCP-0010現(xiàn)貨說明書

Prothrombin and Fragments

凝血酶原和碎片

凝血酶原的結(jié)構(gòu)域

表達(dá)了凝血酶原的結(jié)構(gòu)域，其中：GLA=含有γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域，KRINGLE=內(nèi)部序列同源的區(qū)域，催化結(jié)構(gòu)域=含有絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域箭頭表示在酶原激活過程中被Xa因子蛋白水解的位點。

HCP-0010 人凝血酶原

HCP1-0010 人類凝血酶原片段1

HCP12-0010 人類凝血酶原片段1.2

HCP2-0010 人類凝血酶原片段2

HCP1-0011 人類凝血酶原1

HCP2-0011 人類凝血酶原2

BCP-1010 牛凝血酶原

MCP-5010 小鼠凝血酶原

凝血酶原是一種維生素K依賴性血漿蛋白，在肝臟中合成（1）。之前分泌入血漿，凝血酶原經(jīng)歷由10個特定的谷氨酸殘基轉(zhuǎn)換成γ羧基谷氨酸（GLA）維生素K依賴性羧化酶的翻譯后修飾。十個gla殘基位于成熟蛋白的前40個氨基酸內(nèi)，有助于凝血酶原結(jié)合帶負(fù)電荷的磷脂膜的能力。凝血酶原包含兩個內(nèi)部同源區(qū)域，稱為“ kringle”結(jié)構(gòu)。這些明顯的二級結(jié)構(gòu)區(qū)域位于成熟血漿蛋白的殘基40和270之間，并取代了其他幾種血漿絲氨酸蛋白酶中發(fā)現(xiàn)的生長因子結(jié)構(gòu)域。到目前為止，還沒有將功能歸因于這些區(qū)域，但有人懷疑它們可能在涉及凝血酶原的幾種二元蛋白質(zhì)相互作用中發(fā)揮作用。成熟的單鏈蛋白以酶原的形式在血漿中循環(huán)，并且在凝結(jié)過程中被蛋白水解激活為有效的絲氨酸蛋白酶α-凝血酶。該蛋白水解被凝血酶原酶復(fù)合物催化。在激活過程中，凝血酶原在Arg271-Thr272（人）/ Arg273-Thr274（牛）和Arg320-Ser321（人）/ Arg323-Ser324（牛）處裂解為“ pro”片段（片段1.2）和凝血酶，后者其中由兩條通過二硫鍵共價連接的鏈組成。在人的情況下，凝血酶原/凝血酶，有在Arg284-Thr285的附加凝血酶反饋裂解產(chǎn)生在附加13從成熟凝血酶“A”鏈被除去的氨基酸。

人凝血酶原是從新鮮的冷凍人血漿中制備的，如Bajaj及其同事所述（2）。牛凝血酶原是使用Owen和同事描述的方法的改進(jìn)方法，從新鮮的牛血漿中制備的（3）。純化的凝血酶原以50％（體積/體積）甘油/ H2O的形式提供，應(yīng)儲存在-20oC下。凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶后，通過SDS-PAGE分析確定純度，并通過凝血和/或生色底物測定法測量活性。