KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY由Kohji Kamiya于1983年3月在加利福尼亞州千橡市成立，并于1996年搬遷至華盛頓州西雅圖。我們公司的目的是為生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)界提供高質(zhì)量的創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)室研究和診斷工具。 。 KAMIYA 是一家獨(dú)立的美國(guó)公司，服務(wù)于市場(chǎng)。

公司'批產(chǎn)品是蛋白激酶抑制劑，星形孢菌素及其類似物K252a。Staurosporine于1977年由Satoshi Ohmura博士發(fā)現(xiàn)，他是2015年諾貝爾獎(jiǎng)獲得者。這是個(gè)商業(yè)上可獲得的星形孢菌素。如今，staurosporine是生命科學(xué)研究領(lǐng)域受歡迎的研究工具之一。

如今，神谷 ' 生命科學(xué)產(chǎn)品線包括數(shù)以千計(jì)的人類和動(dòng)物的生物標(biāo)志物的檢測(cè)與ELISA試劑盒在世界上大的選擇之一臨床前試驗(yàn)。 神谷繼續(xù)提供各種其他生命科學(xué)研究產(chǎn)品，包括酶抑制劑和單克隆/多克隆抗體，用于多種領(lǐng)域，包括細(xì)胞凋亡，多藥耐藥，氧化/ DNA損傷和修復(fù)，骨生物學(xué)，癌癥，心臟健康，炎癥，壓力，肥胖和糖尿病。

1997年，KAMIYA推出了全系列臨床診斷和研究免疫測(cè)定產(chǎn)品，用于基于免疫比濁技術(shù)的脂質(zhì)評(píng)估，凝血，炎癥，糖尿病，營(yíng)養(yǎng)評(píng)估和血清蛋白測(cè)量。在K-測(cè)定法 開發(fā)的試劑用于標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)分析儀，不需要混合，溶解或稀釋試劑或樣品，具有特殊的價(jià)值。

近，KAMIYA推出了 用于胰島素，D-二聚體，因子XIII，血漿FDP，血清/尿液FDP和總IgE測(cè)試的新型創(chuàng)新K-ASSAY化學(xué)分析儀試劑。

KAMIYA現(xiàn)在擁有美國(guó)任何公司廣泛的液體血清蛋白免疫分析試劑產(chǎn)品系列。我們?yōu)橄冗M(jìn)的醫(yī)院，醫(yī)療中心，臨床實(shí)驗(yàn)室，臨床參考實(shí)驗(yàn)室，研究機(jī)構(gòu)，分銷商和診斷儀器公司提供臨床診斷試劑。

尋找KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY繼續(xù)為生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)界提供創(chuàng)新和先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室研究和診斷工具

上海起發(fā)kamiyabiomedical KT-354現(xiàn)貨

大鼠微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
微量白蛋白的定量測(cè)定
在大鼠生物樣品中
貨號(hào)：KT-354

Rat Microalbumin ELISA 

微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)大鼠
貨號(hào)KT-354
預(yù)期用途
大鼠微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析方法，用于大鼠生物樣品中微量白蛋白的定量測(cè)定。僅供研究使用。
引言
白蛋白是一種多功能蛋白，通過血流動(dòng)力學(xué)、轉(zhuǎn)運(yùn)和營(yíng)養(yǎng)機(jī)制促進(jìn)體內(nèi)平衡。在所有哺乳動(dòng)物和許多低等脊椎動(dòng)物的血管內(nèi)和血管外都發(fā)現(xiàn)了白蛋白。它是由肝臟合成的約67000道爾頓的分子。通常只有極少量的白蛋白逃過腎小球的再吸收，并被排泄到尿液中。許多隱匿性疾病可導(dǎo)致腎臟損害，這可能導(dǎo)致過量的血清蛋白，包括白蛋白，被腎臟和尿排出。
該ELISA可用于測(cè)定血清、組織提取物和其他生物流體中的白蛋白。
原則
雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的原理如圖1所示。在本試驗(yàn)中，樣品中的白蛋白與已吸附到聚苯乙烯微滴定孔表面的抗-alb抗體反應(yīng)。清洗去除未結(jié)合蛋白后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗-Album抗體。這種HRP結(jié)合抗體與先前結(jié)合的白蛋白形成復(fù)合物。在另一洗滌步驟之后，通過添加顯色底物3,3'，5,5’-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來分析與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合酶的數(shù)量與被測(cè)樣品中白蛋白的濃度直接相關(guān)；因此，在450 nm處的吸收是對(duì)被測(cè)樣品中白蛋白濃度的測(cè)量。這個(gè)
從校準(zhǔn)器建立的校準(zhǔn)曲線中插入試樣中的白蛋白量，并對(duì)樣品稀釋進(jìn)行校正。

圖1.

1.固相結(jié)合抗白蛋白抗體

2.添加校準(zhǔn)器和樣品

3.形成白蛋白*抗白蛋白復(fù)合物

4.去除未結(jié)合的樣本蛋白質(zhì)

5.添加抗alb-hrp共軛物

5.抗ALB HRP*ALB*抗ALB形成的復(fù)合物

6.去除未結(jié)合的抗ALB HRP

7.添加TMB基板

8.測(cè)定結(jié)合酶活性

組件
1。稀釋濃縮液
一瓶含有50毫升5倍濃縮稀釋劑的緩沖液。
2。濃縮洗滌液
一瓶含有50毫升20倍濃縮洗滌液。
三。酶抗體結(jié)合濃縮物
一小瓶含有150微升100倍濃縮親和力純化的抗大鼠白蛋白抗體，該抗體與HRP在A中結(jié)合。
穩(wěn)定緩沖器。
4。TMB基質(zhì)溶液
一瓶含有12毫升TMB和*的檸檬酸緩沖液，pH3.3。
5。停止解決方案
一瓶含有12毫升0.3米硫酸。
警告：避免接觸皮膚。
6。微量滴定板
12個(gè)可拆卸的8個(gè)井條，位于井架框架內(nèi)。用親和力純化的抗鼠白蛋白包被。
7。大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器
一瓶含有凍干大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器。
8。陽性對(duì)照
一瓶含有50升血清和0.1%Sodium azide。濃度見控制證書。
所需但未提供的材料
•用于制造和分配稀釋液的精密移液管（2μl至200μl）
•試管
•微孔板清洗機(jī)/吸氣機(jī)
•蒸餾水或去離子水
•微型板閱讀器
•用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿
•計(jì)時(shí)器

注意事項(xiàng)
1。開始分析前仔細(xì)閱讀說明。
2。此套件僅供研究使用。
三。為保證本產(chǎn)品的質(zhì)量和可靠性，我們付出了很大的努力。但是，有可能
在這種情況下，由于干擾因素的高水平，可能會(huì)得到不尋常的結(jié)果。
4。防腐劑
陽性對(duì)照品含有0.1%Sodium azide。
5。不需要添加劑或防腐劑來保持樣品的完整性。避免疊氮污染。
6。濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞抑制酶反應(yīng)。
7。其他注意事項(xiàng)：
不要交換不同批次的套件組件。
請(qǐng)勿在到期日后使用套件組件。
防止試劑受到陽光直射。
不要用嘴吸液。
不要在使用試劑的地方吃、喝、吸煙或使用化妝品。
使用手套避免接觸試劑。
停止溶液含有稀硫酸。可能刺激眼睛和皮膚。之后用水沖洗
聯(lián)系。
試劑制備
1。稀釋濃縮液
提供的稀釋液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水按1:5稀釋。

2。濃縮洗滌液
提供的洗滌液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水稀釋1:20。水晶
當(dāng)儲(chǔ)存溫度較低時(shí)，濃縮物中的形成并不少見。將濃縮液加熱至
稀釋前30-35°C可溶解晶體。
三。酶抗體結(jié)合濃縮物
通過添加10微升計(jì)算每一個(gè)滴定板試紙所需的工作共軛溶液量。
酶抗體與990微升1X稀釋劑的結(jié)合物，用于測(cè)試每條測(cè)試條。混合均勻，但
輕輕地。避免起泡。
4。TMB基質(zhì)溶液
可隨時(shí)使用。
5。停止解決方案
可隨時(shí)使用。
6。微量滴定板
可隨時(shí)使用。打開微量滴定袋并從袋中取出盤子。移除所有
不用于分析，放回袋中，與干燥劑一起重新密封。
7。大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器
向凍干大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器中加入1.0毫升蒸餾水或去離子水，輕輕攪拌至
溶解。校準(zhǔn)器現(xiàn)在的濃度為200.0μg/ml（重組校準(zhǔn)器應(yīng)為
如果打算將來使用，則應(yīng)重新報(bào)價(jià)并凍結(jié)）。需要立即制備大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器。
使用前（見下表）。在每一步之間充分混合。避免起泡。

8。陽性對(duì)照
濃度和推薦稀釋度見控制證書。使用前，對(duì)陽性對(duì)照品進(jìn)行短暫離心，使所有液體收集在小瓶底部。
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性
1。成套工具
套件的到期日期在外標(biāo)簽上注明。建議的儲(chǔ)存溫度為4°C。注：大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器和陽性對(duì)照品的長(zhǎng)期儲(chǔ)存建議見下文。
2。稀釋劑
5x稀釋液濃縮液在有效期內(nèi)保持穩(wěn)定。1X工作溶液自制備之日起至少穩(wěn)定一周。兩種溶液均應(yīng)在4°C下儲(chǔ)存。
三。洗滌液
20倍洗滌液濃縮液在到期前保持穩(wěn)定。1X工作溶液自制備之日起至少穩(wěn)定一周。兩種溶液都可以在室溫（RT，16-25°C）或4°C下儲(chǔ)存。
4。酶抗體結(jié)合物
未稀釋的抗-alb-hrp結(jié)合物應(yīng)在4°C下儲(chǔ)存，并在使用前立即稀釋。工作共軛溶液在黑暗中儲(chǔ)存時(shí)可穩(wěn)定1小時(shí)。

5。TMB基質(zhì)溶液
TMB基質(zhì)溶液應(yīng)在4°C下儲(chǔ)存，并在到期前保持穩(wěn)定。
6。停止解決方案
停止溶液應(yīng)在4°C下儲(chǔ)存，并在到期前保持穩(wěn)定。
7。微量滴定板
抗鼠白蛋白涂層井在到期日前保持穩(wěn)定，并應(yīng)在4°C溫度下儲(chǔ)存在帶干燥劑包裝的密封箔袋中。
8。大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器
凍干大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器應(yīng)在4°C下儲(chǔ)存或冷凍，直到重組。重組校準(zhǔn)器應(yīng)重新標(biāo)定并冷凍保存。避免多次凍融循環(huán)。工作校準(zhǔn)液應(yīng)在使用前立即制備，并穩(wěn)定8小時(shí)。
9。陽性對(duì)照
對(duì)于超過7天的儲(chǔ)存，應(yīng)將其冷凍至到期日。在4°C溫度下儲(chǔ)存少于7天。避免多次冷凍/解凍循環(huán)。
不穩(wěn)定跡象
如果測(cè)試正確，用校準(zhǔn)溶液觀察到的結(jié)果應(yīng)在預(yù)期值的20%以內(nèi)。
樣本收集和處理
通過靜脈穿刺和血分離后的血液，通過離心分離收集血液。
對(duì)于血漿樣品，應(yīng)將血液收集到裝有抗凝劑的容器中，然后離心分離。應(yīng)注意盡量減少溶血，過度溶血會(huì)影響您的結(jié)果。立即化驗(yàn)或等分樣品，并將樣品儲(chǔ)存在-20°C。避免重復(fù)冷凍/解凍。
對(duì)于任何可能含有病原體的樣本，必須注意防止接觸開放性傷口。不需要添加劑或防腐劑來保持樣品的完整性。避免疊氮污染。
分析方案
樣品稀釋
由于分析的高敏感性質(zhì)，每個(gè)樣品在用于正常分析前應(yīng)稀釋。1:500稀釋適合于大多數(shù)尿樣，而血清或血漿樣品可能需要稀釋1∶100萬。對(duì)于在校準(zhǔn)曲線范圍之外產(chǎn)生結(jié)果的樣品的定量，可能需要更小或更大的稀釋度。如果不確定樣品水平，則應(yīng)使用一個(gè)或兩個(gè)代表性樣品進(jìn)行連續(xù)稀釋。
強(qiáng)烈建議運(yùn)行整個(gè)板。
準(zhǔn)備1:500稀釋的樣品，將2微升樣品轉(zhuǎn)移到998微升1X稀釋劑中。這樣可以稀釋1:500。
對(duì)于血清或血漿樣品，將血清或血漿中的2 L L轉(zhuǎn)化為1X稀釋液的1998 L。現(xiàn)在稀釋度為1:1000。接下來，將2微升1:1000稀釋液與1998微升1X稀釋液混合。現(xiàn)在稀釋1:1000000。在每個(gè)階段*混合。

程序
1。使用前將所有試劑置于室溫。
2。移液管100微升
校準(zhǔn)器0（0.0 ng/ml）一式兩份
校準(zhǔn)器1（6.25 ng/ml）一式兩份
校準(zhǔn)器2（12.5 ng/ml）一式兩份
校準(zhǔn)器3（25 ng/ml）一式兩份
校準(zhǔn)器4（50 ng/ml）一式兩份
校準(zhǔn)器5（100 ng/ml）一式兩份
校準(zhǔn)器6（200 ng/ml）一式兩份
校準(zhǔn)器7（400 ng/ml）一式兩份
三。用移液管將100微升稀釋陽性對(duì)照品（一式兩份）移入預(yù)先的孔中。

4。用移液管將100微升稀釋樣品（一式兩份）移到預(yù)先的孔中。
5。將微量滴定板在22°C（RT）下培養(yǎng)30（30±2）分鐘。孵育期間，將培養(yǎng)皿蓋好并保持水平。
6。孵育后，吸入井內(nèi)的物質(zhì)。
7。用適當(dāng)稀釋的洗滌液將每口井注滿并抽吸。重復(fù)三次，總共洗四次。如果是手動(dòng)清洗：將稀釋的清洗液*注入井內(nèi)，倒置板，并將內(nèi)容物倒入/搖出廢物容器。然后，在吸水紙上用力打井，去除殘留的洗滌液。重復(fù)三次，共洗四次。
8。用移液管將100微升適當(dāng)稀釋的酶抗體結(jié)合物移到每個(gè)孔中。在22°C（RT）下培養(yǎng)30（30）
±2）分鐘。培養(yǎng)過程中，將培養(yǎng)皿蓋在黑暗中并保持水平。
9。按照步驟6和7中所述清洗和吸干井。
10。用移液管將100微升TMB基質(zhì)溶液移到每個(gè)孔中。
11。在室溫下在黑暗中孵育10分鐘。
12。10分鐘后，向每個(gè)孔中添加100μl的停止溶液。
13。測(cè)定每孔含量450 nm時(shí)的吸光度。按照制造商的規(guī)格校準(zhǔn)板讀卡器。
終反應(yīng)混合物的吸光度可在添加停止溶液后2小時(shí)內(nèi)測(cè)量。然而，良好的實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐要求盡快進(jìn)行測(cè)量。
結(jié)果
1。從每個(gè)樣本的測(cè)試值中減去平均背景值。
2。利用為校準(zhǔn)器觀察到的結(jié)果構(gòu)建校準(zhǔn)曲線。雖然也可以使用二階多項(xiàng)式（二次）或其他曲線擬合，但合適的曲線擬合是四參數(shù)物流曲線的擬合。
三。從校準(zhǔn)曲線中插入測(cè)試樣品值。校正樣品稀釋系數(shù)，使其達(dá)到原樣品中微量白蛋白的濃度。
性能特點(diǎn)
根據(jù)良好的實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐，特定微量白蛋白的檢測(cè)需要精心的質(zhì)量控制。各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用常規(guī)的質(zhì)量控制程序，以確定化驗(yàn)間和化驗(yàn)內(nèi)的精密度和性能特征。
程序的限制
1。在*理解信息的情況下進(jìn)行分析程序，將獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果。
包含在包裝說明書中，并遵守良好的實(shí)驗(yàn)室慣例。
2。影響分析性能的因素包括儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質(zhì)量、試劑和樣品管的準(zhǔn)確度、清洗技術(shù)、培養(yǎng)時(shí)間或溫度。